bradford（bradfordpa什么意思）

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1、测试样品待测样品蛋白浓度稀释在50-500μg/ml范围内为宜。仪器96孔酶标、酶标仪。

2、Bradford法测定bai蛋白质浓度：实验原理。双缩脲法（duBiuret法）和zhiFolin—酚试剂法（Lowry法）的明显缺点和许多限制dao，促使科学家们去寻找更好的蛋。

3、是的，先用OD和蛋白质浓度在EXCEL做标准曲线。OD值为X轴，蛋白质浓度为Y，生成曲线，从曲线里得出方程。然后将未知蛋白的OD值代入方程，就能求出未知蛋白的蛋白质浓度。测的吸光值不要太大和太小。否则误差太大。

4、考马斯亮蓝法测定蛋白质含量流程：该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精确的，但不适用于小分子碱性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污剂的浓度超过0．2%影响测定结果。如TritonX-100、SDS、NP-40等。

5、bradford法测定蛋白质含量的原理是考马斯亮蓝G250与蛋白质结合可以显色，用分光光度计在吸光度595nm处读数，通过标准蛋白与G250结合显色建立标准曲线，再加待测蛋白与G250结合显色后读数代入标准曲线测定蛋白质含量。

6、bradford法测定蛋白质含量，也就是考马斯亮蓝法，其原理是考马斯亮蓝在游离状态下呈棕红色，最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为蓝色，蛋白质—色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。

也称考马斯蓝染色法（coomassie blue staining）又称Bradford法，是 Bradford 于 1***6 年建立起来的一种蛋白质浓度的测定方法。由于其突出的优点，正得到越来越广泛的应用。

***用Bradford法，即考马斯亮蓝法测定蛋白质的含量。原理是考马斯亮蓝在电离状态下呈现棕红色，最大吸光量为488nm。当与蛋白质结合时，它变成蓝色，并且蛋白质与色素结合时在波长595nm处吸收光最大。

年由bradford建立的考马斯亮兰法（bradford法），是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点，因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。

是的，先用OD和蛋白质浓度在EXCEL做标准曲线。OD值为X轴，蛋白质浓度为Y，生成曲线，从曲线里得出方程。然后将未知蛋白的OD值代入方程，就能求出未知蛋白的蛋白质浓度。测的吸光值不要太大和太小。否则误差太大。

ford标号法优点是，灵敏度高，测定快速、简便，只需加一种试剂，干扰物质少。

bradford法测定蛋白质含量，也就是考马斯亮蓝法，其原理是考马斯亮蓝在游离状态下呈棕红色，最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为蓝色，蛋白质—色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。

优点是：方法简单、灵敏、快速、高选择性，且稳定性好，不消耗样品，低浓度的盐类不干扰测定。

都有其优缺点。在选择方法时应考虑：①实验对测定所要求的灵敏度和精确度；②蛋白质的性质；③溶液中存在的干扰物质；④测定所要花费的时间。考马斯亮蓝法（Bradford法），由于其突出的优点，正得到越来越广泛的应用。

优点：快速，样品不会受到干扰。缺点：没有其他方法准确。双缩脲法（Biuret）工作原理：测量肽键，在540nm测定OD值。优点：快速，由于盐浓度的干扰比Bradford 法小，可用于追踪蛋白质分离过程。缺点：低浓度时测量不准确。

Bradford法原理是将蛋白质及它的沉淀由蛋白质合酶结合至二价铬J络合物，从而形成一种光电的特异性比色反应。

凯氏定氮法的理论基础是蛋白质中的含氮量通常占其总质量的16%左右，因此，通过测定物质中的含氮量便可估算出物质中的总蛋白质含量（***设测定物质中的氮全来自蛋白质），即：蛋白质含量=含氮量/16%。

间接测定法：蛋白质与某些酸性或碱性色素分子结合形成不溶性的盐沉淀。用分光光度计测定未结合的色素，以每克样品结合色素的量来表示蛋白质含量的多少。

实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难（现在已可以订购），近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。